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【產品名稱】

通用名:不完全抗體檢測試劑盒(高密度介質固相抗人球蛋白法)

英文名:Incomplete Antibody Test Kit (High Density Medium Solid-phase Coombs Test)

【規    格】96T/盒

【預期用途】

用於不完全抗體交叉配血及不完全抗體篩檢。

【檢測原理】

反應板由反應腔與分離腔組成,分離腔底部已包被有抗人球蛋白,首先加入高密度介質,其上為反應腔,在反應腔中加入血清和紅細胞,經孵育後離心,利用高密度介質作為隔離液,將抗人球蛋白與遊離的血清IgG隔離。若在反應體係中存在抗原抗體複合物,則在離心力的作用下,抗原抗體複合物與包被在分離腔上的抗人球蛋白結合,在分離腔底部形成紅細胞鋪層,為陽性反應;未形成抗原抗體複合物的遊離細胞,在分離腔底部形成紅細胞聚集,為陰性反應。

【主要組成成份】

1、分離腔(8孔×12):反應孔內包被有抗人球蛋白。

2、反應腔(4孔×24)

3、隔離液(10ml×1) :含20% PEG4000,0.1%明膠及0.1%疊氮鈉。

4、陽性對照(1ml×1):含IgG抗D及0.1%疊氮鈉。

5、陰性對照(1ml×1):不含IgG抗D,含0.1%疊氮鈉。   

6、封口膠(2張)         

7、自封袋(1個)          

8、說明書(1份)

注:在其有效期內,各批試劑盒的各組分可互換使用。

【儲存條件及有效期】

1、儲存:2-8℃保存。分離腔拆開後,未使用的分離腔應放入自封袋內,加入幹燥劑封好後,儲存在2-8℃。

2、有效期:自生產之日起1年,試劑開瓶後可在有效期內使用。

【適用儀器】

 

 

g/r   g/r

平板式離心機。離心力和離心轉數的換算公式為:rpm=299     (r為離心半徑,單位為cm)。

 

【樣本要求】

抗凝血或血清樣本,應無溶血、黃疸、高脂現象。所有標本應存放於2~8℃保存。CPD、CPDA抗凝的成分血,可在其有效期內使用。EDTA等抗凝的血漿標本以及未抗凝的血清標本,應在采集後72小時內檢測。

【檢測步驟】

交叉配血

首先進行鹽水介質交叉配血,若檢測結果為陰性,則按下述操作進行抗人球蛋白交叉配血檢測:

1、分別將獻血者與受血者的紅細胞準確配成0.5%的生理鹽水懸液。

2、按待檢樣本數量取出所需的分離腔,未使用的分離腔放於帶有幹燥劑的自封袋中保存。

3、將分離腔放於支架中,標記好主側、次測。向分離腔中先加入100µl(2滴)隔離液,卡上反應腔,向主側反應腔中加入50µl(1滴)受血者血清(或血漿)與50µl(1滴)獻血者紅細胞;向次側反應腔中加入50µl(1滴)獻血者血清(或血漿)與50ul (1滴)受血者紅細胞。

4、將反應孔封口,37℃孵育20分鍾。

5、取出反應板,1300rpm(200g)離心4分鍾,1000rpm(120g)離心1分鍾。

6、將待檢孔與對照孔的結果進行比較,觀察並記錄結果。

不完全抗體篩檢

1、按待檢樣本數量取出所需的分離腔,未使用的分離腔放於帶有幹燥劑的自封袋中封口保存。

2、將分離腔放於支架中,標記好陰、陽性對照及檢測孔。

向分離腔中加入100µl(2滴)隔離液。卡上反應腔,向反應腔中分別加入50µl(1滴)陰性對照、陽性對照、待檢血清(或血漿);最後向反應腔中加入50µl(1滴)0.5%篩檢細胞。

3、將反應腔封口,37℃孵育20分鍾。

4、取出反應板,1300rpm(200g)離心4分鍾,1000rpm(120g)離心1分鍾。

5、將檢測孔與對照孔的結果進行比較,觀察並記錄結果。

【檢測結果的解釋】

肉眼觀察,結果判定標準如下:

4+ 紅細胞在反應孔底部形成完整的鋪層

3+ 紅細胞在反應孔底部形成不完整的鋪層,孔底部中央可有少量紅細胞聚集

2+ 紅細胞在孔底部中央形成小圓環或點,同時周圍有較多的紅細胞鋪層

+ 紅細胞在孔底部中央形成小圓環或點,同時周圍有少量的紅

細胞鋪層

-紅細胞全部聚集在孔底部中央,形成細胞

 

4+          3+        2+         1+        -

陽性結果表明待檢者血清中含有與篩檢細胞反應的抗體或交叉配血不合。

陰性結果表明待檢者血清中不含與篩檢細胞反應的抗體或交叉配血相合。 

如果結果可疑,陽性對照和/或陰性對照沒有出現正確結果,則試驗必須重做。

【注意事項】

1、準確配製0.5%紅細胞懸液,細胞濃度過高易出現假陰性結果;細胞濃度過低易出現假陽性結果。

2、本試驗應在室溫下操作。

3、本試驗中陽性結果有時會出現反應板底部呈中空狀態,屬正常現象。

4. 本試劑含人陰性對照及陽性對照中含有人源性成分,雖然HIV、HBV、HCV、TP檢測均為陰性,但不能保證絕對安全,應視為具有潛在的傳染性,使用時應進行適當的防護。

5.本試劑中含有0.1%疊氮鈉,對人體有毒,在操作時要小心仔細,嚴禁口吸,防止試液濺及眼、口腔等部位,若不小心濺及,宜用大量清水衝洗幹淨;因疊氮鈉可與銅鉛等金屬反應形成可爆炸性疊氮化合物,故廢液倒入下水道後必須用大量清水衝洗,防止疊氮鈉在金屬管道堆積。

【參考文獻】

1. Plapp FV, Rachal JM, Beck ML, et al. Blood antigens and antibodies: solid-phase adherence assay. Lab Manage 1984;22:39–46.

2. Llopis F, Carbonell-Uberos F, Planelles MD, et al. A new microplate red blood

cell monolayer technique for screening and identifying red blood cell antibodies. Vox Sang 1996;70:152–6.

【生產企業】

企業名稱:長春博德生物技術有限責任公司

地  址:吉林省長春市晨光街433號

郵政編碼:130012

電話號碼:0431-85100346/85190640

傳真號碼:0431-85177820

網  址:www.bloodgroup.com.cn

 

 

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